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液質聯用儀證實"基因編輯豬"產生人胰島素
發布者: 發布時間:2016/4/6 閱讀:1611

中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院29日發布消息稱,該院賴良學課題組利用精確基因編輯技術對豬胰島素基因進行了無痕定點修飾,使豬胰島素基因編碼生產人胰島素,成功建立了完全分泌人胰島素的基因編輯豬。這一研究成果近期被《分子細胞生物學雜志》在線發表。

  根據國際糖尿病聯盟在2015年發布的數據,世界范圍內共有4.15億名成年人患有糖尿病。2015年有500萬人因糖尿病而死亡,超過了瘧疾、肺結核與HIV的致死人數總和。

  據課題組介紹,目前,對糖尿病的治療包括胰島素注射和胰島移植。豬源胰島素曾經被廣泛采用,利用豬胰島進行異種移植治療糖尿病最近也取得良好進展。但豬與人相比,胰島素蛋白存在一個氨基酸的差異,人胰島素B鏈第30位氨基酸是蘇氨酸,而豬胰島素是丙氨酸。這一個氨基酸的差異使豬胰島素在人體中的降血糖效價較低,而且長期使用容易誘發抗體產生。

  研究人員李小平博士、楊翌博士和王可品博士研究生等將TALENs(轉錄激活因子樣效應物核酸酶)及CRISPR(RNA介導的DNA核酸酶)技術與單鏈寡核苷酸結合,建立了豬基因組無痕定點編輯技術,利用該技術在體細胞中將豬胰島素基因編碼B鏈第30位丙氨酸的密碼子GCC修改為編碼蘇氨酸的ACG,并獲得了純合子細胞株。同時,研究人員利用該細胞株作為核供體,通過體細胞核移植技術成功構建了人源化胰島素克隆豬,利用高分辨率液相色譜串聯質譜儀檢測證實,從該基因修飾豬胰腺中提取的胰島素完全為人胰島素,而不含豬胰島素。

  研究人員說,該研究獲得的人源化胰島素基因修飾豬將為糖尿病的治療提供人胰島素,同時也將為臨床異種胰島移植治療提供更為理想的供體來源。從技術層面來說,該成果也是第一次在大動物中實現無痕的基因組定點修飾,這種定點無痕技術的建立,將推動基因突變大動物疾病模型和具有農業育種價值的基因修飾大動物的培育。

 
 

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